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| 来源： | 发布时间： 2012-9-14 17:07:06 | 浏览： 720 |
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特点: 该原核细胞表达载体是来源于以T7 RNA聚合酶为基础的pET载体，含有T7/LacO启动子、编码钙调素结合多肽标鉴和凝血酶切点的核苷酸序列。因此，该表达载体在E.coli BL21(DE3)或BL21(DE3)pLysS宿主菌中能高水平表达外源蛋白质、且这种表达的外源蛋白质因带有钙调素结合多肽和凝血酶切点，故该蛋白产物易于纯化和产业化。
此外，本公司利用分泌信号肽PelB，构建成新型的的原核细胞表达载体Pcal-PelB。此载体表达的蛋白产物能在分泌肽PelB的指引下进入细胞周质。
.jpg) b-1. Pcal-n
M K R R W K K N F I A V S A A N R F K K I S S S G A L L V P
CATATGAAG GGACGATGGAAAAAACAATTTCATAGCCGTCTCAGCAGCCAACCCGCTTTAAGAAAATCTCATCCTCCGGGGCACTTCTGGTTCC
Nde1
R G S P G I L D S M G R L E L K L R S A
GCGTGGATCCCCGGGAATTCTAGACTCCATGGGTCGACTCGAGCTCAAGCTTAGATCCGCC
↑BamH1 Sma1 EcoR1 Nco1 Sal1 Xho1 Sac1 Hnd111
b-2. Pcal-PelB（含有pelB分泌肽）:
Nde1
actggagact catATG AAA TAC CTA TTG CCT ACG GCA GCC GCT GGA TTG TTA TTA CTC GCG GCC CAG GGC
M K Y L L P T A A A G L L L L A A Q P
Nco1 Msc1 BamH1 EcoR1 Sal1
GCC ATG GCC aaggatcctaagtaagtagaattctgagtaggtaagtcgacaatcgcgtctagagccc cgacgcgctggg
A M A * * * * * *
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